Een scheikundige verdunningsreeks maken

In de chemie is een verdunning het proces waarbij de concentratie van een stof in een oplossing wordt verminderd. Een seriële verdunning of verdunningsreeks is de herhaalde verdunning van een oplossing voor het snel versterken van de verdunningsfactor.^[1]XBron Dit wordt vaak uitgevoerd tijdens experimenten waarbij zeer verdunde oplossingen met grote nauwkeurigheid zijn vereist, zoals die met concentratiecurven op een logaritmische schaal of die experimenten voor het bepalen van de dichtheid van het aantal bacteriën. Seriële verdunningen worden veel gebruikt in experimentele wetenschappen, zoals biochemie, microbiologie, farmacologie en natuurkunde.

Methode 1

Methode 1 van 2:

Een standaardverdunning uitvoeren

Pdf downloaden

1
Bepaal wat de juiste verdunningsvloeistof is. De vloeistof die je gaat gebruiken voor het verdunnen van een substantie is zeer belangrijk. Veel oplossingen worden verdund in gedistilleerd water, maar dit is niet altijd het geval. Als je bacteriën of andere cellen gaat verdunnen, dan ga je waarschijnlijk verdunnen in kweekmedia.^[2]XBron De vloeistof die je kiest zal worden gebruikt voor elke seriële verdunning.
- Weet je niet zeker welke verdunningsvloeistof je moet gebruiken, vraag dan om hulp of zoek dit online op, om na te gaan of andere mensen een soortgelijke verdunning hebben uitgevoerd.
2
Bereid verschillende reageerbuisjes voor met 9 ml verdunningsvloeistof. Deze buisjes dienen als de beginwaarden van je verdunning.^[3]XBron Je gaat het onverdunde monster toevoegen aan de eerste buis en vervolgens serieel verdunnen in de volgende buizen.
- Het is handig om, voordat je begint, alle buisjes van een label te voorzien, zodat je niet in de war raakt wanneer je eenmaal met de verdunningen aan de slag gaat.
- Elke reageerbuis bevat een 10-voudige verdunning vergeleken met de onverdunde vloeistof.^[4]XBron De eerste reageerbuis wordt een verdunning van 1:10, de tweede van 1:100, de derde van 1:1000, enz. Bepaal vooraf het aantal verdunningen dat je nodig hebt, zodat je geen reageerbuizen of verdunningsvloeistof verspilt.
3
Prepareer een reageerbuis met ten minste 2 ml van de onverdunde oplossing. De minimale benodigde hoeveelheid voor deze seriële verdunning is 1 ml van de onverdunde oplossing. Als je slechts 1 ml hebt, dan krijg je geen resterende onverdunde oplossing. Label deze buis als OO voor Onverdund Oplossing.
- Meng de oplossing grondig voordat je begint met verdunnen.^[5]XBron
Neem 1 ml van de onverdunde oplossing in reageerbuis OO op met een pipet en breng dit over naar de reageerbuis gelabeld 1:10 met 9 ml van de verdunningsvloeistof, en meng. Er is nu 1 ml van de onverdunde oplossing in 9 ml van de verdunningsvloeistof. Aldus is de oplossing verdund met een factor 10.
Voor de tweede seriële verdunning neem je 1 ml van de oplossing uit reageerbuis 1:10 en doe je dit bij de 9 ml-verdunning in de reageerbuis 1:100. Meng reageerbuis 1:10 grondig alvorens dit toe te voegen aan de volgende reageerbuis. Men nogmaals de reageerbuis 1:100 na verdunning. De oplossing van reageerbuis 1:10 is nu 10-voudig verdund in reageerbuis 1:100.
Dit proces kan zo vaak als nodig is om de gewenste oplossing te verkrijgen worden herhaald. In een experiment met concentratiecurven, kun je een seriële verdunning maken van een reeks oplossingen met verdunningen van 1, 1:10, 1:100, 1:1000.
Advertentie

Methode 2

Methode 2 van 2:

Bereken de eindverdunningsfactor en concentratie

Pdf downloaden

1
Bereken de verhouding van de eindverdunning in een seriële verdunning. De totale verdunningsverhouding kan worden bepaald door vermenigvuldiging van de verdunningsfactor van elke stap op weg aanloop naar de laatste stap. Dit kan wiskundig worden geïllustreerd met de vergelijking D_t=D₁ x D₂ x D₃ x … x D_n waarbij D_t de totale verdunningsfactor is en D_n de verdunningsverhouding.^[6]XBron
- Bijvoorbeeld, laten we zeggen dat je 4x een verdunning op een vloeistof hebt toegepast van 1:10. Pas je verdunningsfactor toe op de vergelijking: D_t=10 x 10 x 10 x 10=10.000
- De uiteindelijke verdunningsfactor in de van de vierde reageerbuis van je seriële verdunning is 1:10.000. De concentratie van de stof is nu 10.000 keer minder dan de originele onverdunde oplossing.
2
Bepaal de concentratie van de oplossing na verdunning. Om te bepalen wat de uiteindelijke concentratie is van de oplossing na seriële verdunning, moet je weten wat de beginconcentratie was. De vergelijking is C_eindwaarde=C_beginwaarde/D waarbij C_eindwaarde de uiteindelijke concentratie is van de verdunde oplossing, C_beginwaarde de beginconcentratie van de oorspronkelijke oplossing en D de verdunningsverhouding zoals eerder vastgesteld.^[7]XBron
- Bijvoorbeeld: Als je begon met een oplossing van cellen met een concentratie van 1.000.000 cellen per ml en een verdunningsverhouding van 1.000, wat is dan de uiteindelijke concentratie van het verdunde monster?
- Met behulp van de vergelijking:
  - C_eindwaarde=C_beginwaarde/D
  - C_eindwaarde=1.000.000/1.000
  - C_eindwaarde=1.000 cellen per ml.
Bij het uitvoeren van een berekening dien je ervoor te zorgen dat de eenheden van het eindresultaat altijd kloppen.^[8]XBron Ben je begonnen met 'cellen per ml' zorg er dan voor dat je ook eindigt met 'cellen per ml'. Als je beginconcentratie in 'delen per miljoen (ppm)' is aangegeven, dan dient je eindconcentratie ook 'ppm' te zijn.
Advertentie